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[B] 얇은 막 크로마토그래피 [TLC]

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얇은 막 크로마토그래피 [TLC]



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실험결과/기타


설명

얇은 막 크로마토그래피 (TLC)



요약. 얇은 막 크로마토그래피를 이용하여 혼합물의 분리를 확인하였다. 유리판에 실리카 겔(silica gel)이 입혀져 있는 얇은 판(TLC판)을 이용했다. TLC판에 모세관으로 시료를 떨어뜨린 후 유기용매가 들어있는 비커에 TLC판을 기울여서 넣은 뒤 랩으로 덮었다. 유기용매가 TLC판에 표시해 둔 부분까지 올라왔을 때 비커에서 빼낸 후 말렸다. 그 후 TLC판에 표시해둔 길이와 각 시료가 번진 곳까지의 길이를 재서 Rf값을 구하였다.
I. 서론

얇은 막 크로마토그래피(TLC)는 소량의 유기화합물의 혼합물을 신속히 분리, 확인하는데 사용되는 중요한 기술이다. 이 방법은 전개시간이 짧고, 고온에서 전개가 용이하며 그리고 확인시약의 적용범위 매우 넣은 특징이 있다.
이번 실험에서는 유기화합물인 알리자린 옐로우, 메틸렌 블루, 페놀 레드를 TLC를 하여 3개의 시료와 3개의 시료를 혼합한 혼합물을 TLC판에 전개시키고 Rf값을 구해보자고 한다.

II. 理論적 배경

얇은 막 크로마토그래피(TLC)는 고체·액체 흡착크로마토그래피의 한 가지 형태로서 관 크로마토그래피와 동일한 원리가 적용된다된다. 얇은 막 크로마토그래피에서는 유리판이나 플라스틱판과 같은 받침판에 silicagel과 같은 고체 흡착제의 얇은 막을 입혀서 사용한다. 입자의 크기와 막의 두께는 목적에 따라 각각 달리할 수 있으며 입자의 크기는 미세하면서 균일해야 한다. 분리 또는 정제하고자 하는 물질의 용액을 모세관에 묻혀서 TLC판의 한 쪽 끝 가까이에 반점을 만든다. 이 판을 전개제가 들어있는 용기에 담그는데 전개제는 주로 유기용매나 물을 사용한다. 용매의 액면은 반점 바로 아래 오도록 해야 하며 시료 반점이 용매에 잠기지 않도록 해야 한다. 용매는 모세관 작용에 의하며 판을 따라 위로 이동하면서, 시료 혼합물에 있는 각 component 물질들을 각각 다른 속도로 끌고 올라간다. 용매에 쉽게 녹으면서도 고체에서는 가장 약하게 흡착되는 물질일수록 고체에 …(drop) 세게 흡착되는 물질보다 빠른 속도로 상승할 것이다. 실험에 사용되는 용매와 분리되어 생긴 일련의 반점들이 용매 액면에 수직한 일직선상에 늘어선다. 용매의 처음 위치로부터 용매선까지의 거리 즉 전개제가 이동한 거리와 각 반점들까지의 거리를 잰다.

component물질이 이동한 거리
Rf 〓
전개제가 이동한 거리

Rf의 값은 각 물질의 성질, 용매의 종류 및 온도에 따라 달라질 수 있지만 흡착제, 용매막의 두께, 균일성, 온도 등이 동일한 조건에서 행해질 때의 값은 일정하다. 색깔이 있는 물질일 경우에는 크로마토그래피 상의 반점을 알아보기 쉽지만 무색의 물질일 경우는 반점의 위치를 확인하기 위하여 발색제를 뿜어 준다던가 또는 자외선을 쬐어서 형광을 발하는 다른 수단을 써야 한다.

* 사용되는 흡착제의 조건
① 산성이나 염기성이 크지 않는 무색 무기질
② 용제에 불과한 것
③ 물질과 화학 反應이 일어나지 않는 것
④ 물질에 대한 흡착력이 크고 입자의 크기가 균일한 것


III. 시약 및 기구

1. 시약
1) 알리자린 옐로우 : C14H8O4, 분자량 240.22, 유기용매에 잘 녹음, 독성이 있음
2) 메틸렌 블루 : C16H18N3SCl·3H2O, 분자량 373.90, 짙은 청색의 염기성색소, 유기용매에 잘 녹지 않음, 산화환원지시약으로 사용
3) 페놀 레드 : C19H14O5S, 분자량 354.26, 산염기 지시약, 붉은색의 고체로, 산성에서는 황색, 염기성에서는 적색
4) 1-부탄올 : CH3CH2CH2CH2OH, 분자량 74.12 부탄올의 이성질체, 각종 에스테르 합성원료로 사용 됨
5) 에탄올 : C2H5OH, 분자량 46.07, 무색투명의휘발성 액체. 물에 쉽게 녹음, 마취성이 있음
6) 암모니아 : NH3, 분자량 17.03, 무색 기체, 알카리성, 점막을

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얇은 막 크로마토그래피 [TLC]

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